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2013-12
蛋白质技术专题：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测外源蛋白的表达
[实验原理]SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）是蛋白分析中zui经常使用的一种方法。它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠（SDS）以及巯基乙醇一起加热，使蛋白变性，多肽链内部的和肽链...
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2013-12
蛋白质技术专题：聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度
（一）原理由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制，因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”zui大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是：（1）使用两种...
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2013-12
蛋白质技术专题：蛋白质抽取
蛋白质在细菌中表现后，以反复的冷冻-解冻方法打破细胞，再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来，此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。仪器用具：恒温震荡培养箱37℃；高速冷冻离心机及离心管（使用20,000r...
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2013-12
蛋白质技术专题：folin—酚试剂法（lowry法）测蛋白质含量
一、实验原理这种蛋白质测定法是zui灵敏的方法之一。过去此法是应用zui广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的...
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2013-12
蛋白质技术专题：PPO粗酶液的纯化
一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部zui先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而zui后流出柱外，凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开...
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2013-12
蛋白质技术专题：蛋白质测序
一、概念当前，所谓蛋白质测序，主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构（Primarystructure）包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链的氨基酸顺序，它...
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2013-12
蛋白质技术专题：免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白（ImmunoglobulinIg）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学...