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2017-8
原代培养经验分享
经验分享:1.原代细胞铺満瓶底后弃原液,PBS冲洗2次。2.加入0.25%Trypsin-0.02%EDTA,量覆盖瓶底即可,室温作用,镜下观察至组织块周围的细胞回缩,立体感增强。3.弃去消化液,PB...
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2017-8
体外细胞的原代培养、冻存和复苏,传代培养
三、实验结果计算1.一只小鼠可获得(1~2.5)×108个脾细胞。2.细胞接种后一般几小时内就能贴壁,并开始生长,如接种的细胞密度适宜,5天到一周即可形成单层。3.一般情况,传代后的细胞在2小时左右就...
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2017-8
体外细胞的原代培养、传代培养、冻存和复苏2
一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养,即将培养的细胞分散后,从一个容器以1:2或其他比率转移到另...
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2017-8
定量PCR实验技术分享1
1.如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决没有ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础...
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2017-8
实时荧光定量PCR具体实验步骤1
1样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。②两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4...
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2017-3
单细胞凝胶电泳标准操作3
实验原理在细胞核中,DNA是环状附着在核基质上,细胞裂解过程中,核基质被溶解、抽提,DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口,则使DNA超螺旋变的松弛,DNA环向外展,同时由于暴露了阴电荷,在...
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2016-8
多克隆抗体的免疫电泳操作流程
实验原理免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM,IgG,IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼...