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2013-11
PCR技术专题：免疫PCR系列三-基本实验步骤
主要程序（1）抗原+生物素化抗体→抗原-生物素化抗体复合物；（2）加亲合素→抗原-生物素化抗体-亲合素复合物；（3）加生物素化DNA→抗原-生物素化抗体-亲合素-生物素化DNA；（4）PCR扩增生物素...
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2013-11
PCR技术专题：PCR扩增分离目的DNA段实验原理、材料和步骤
一、目的了解多聚合酶链反应DNA扩增技术的基本原理和实验应用，掌握PCR反应基本技术。二、原理PCR（PolymeraseChainReaction）即聚合酶链式反应是1986年由KallisMull...
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2013-11
PCR技术专题：PCR产物的克隆
PCR产物克隆大致分为两类，即平头连接和粘头连接。平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoRV或SmaI切成平头；PCR产物纯化后，可以在22℃用DNA聚合酶I...
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2013-11
PCR技术专题：反向PCR （inverse-PCR）实验步骤
inverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多，而Inverse-PCR一般只要有特异条带，基本上就是目的片段。基本步骤如下：1、反向PCR（Inve...
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2013-11
PCR技术专题：菌落PCR
菌落PCR标签：菌落PCR菌落PCR（ColonyPCR）可不必提取基因组DNA，不必酶切鉴定，而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增，省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法...
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2013-11
PCR技术专题：巢式PCR
巢式PCR标签：巢式PCR巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应（PCR），使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。*对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物（因为他们在*次PC...
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2013-11
PCR技术专题：限制性片段长度多态性（RFLP）分析
本实验将应用RFLP分析技术检测NMDA受体中的GRIN2A亚基基因3号内含子中的2个SNP位点rs17750303（A→C）和rs837690（A→G）。[实验原理]DNA限制性内切酶具有识别特定的...