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2013-11
PCR技术专题：PCR法检测乙肝病毒（HBV）
PCR方法操作简便，灵敏度高，可检测出少至0.1pg的目的DNA。目前已广泛应用于多种病原微生物的检测。乙肝病毒（HBV）感染引起的乙型肝炎，在我国发病率很高，而且HBV与肝硬化、原发性肝癌关系密切，...
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2013-11
PCR技术专题：分子标记——AFLP原理和操作步骤
一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增，然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳，多态性即以...
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2013-11
PCR技术专题：PCR-SSCP 技术实验
实验原理聚合酶链式反应-单链构象多态（PolymeraseChainReaction-SingleStrandConformationPolymorphism，PCR-SSCP）技术是在PCR技术基础...
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2013-11
PCR技术专题：直接原位PCR（In situ PCR）
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色...
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2013-11
PCR技术专题：实时荧光定量PCR具体实验步骤
1样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。②两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。...
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2013-11
PCR技术专题：聚合酶链式反应（PCR）扩增和扩增产物克隆
PCR（PolymeraseChainReaction，聚合酶链反应）是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤：（1）变性（Denature）：目的双链DNA段在94℃下解链；（2...
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2013-11
PCR技术专题：逆转录-聚合酶链反应实验方法
逆转录-聚合酶链反应（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction，RT-PCR）的原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oli...