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2013-10
细胞转染:脂质体转染的几个实验方法
摘要:本实验介绍了脂质体转染的几个方法。实验原理脂质体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前条件下zui方面的转染方法之一...
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2013-10
细胞转染实验
一、实验目的学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。二、实验原理上图所示是脂质体介导转染的示...
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2013-10
感受态制备:大肠杆菌感受态细胞的制备、重组DNA的转化、克隆筛选
1.实验目的和要求通过本实验学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.相关知识及原理感受态细胞(C...
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2013-10
RNA实验技术:核糖核酸酶保护分析
一、体外转录在无菌1.5ml微型离心管中,结合以下内容:4ul5倍转录缓冲液2ul0.1MDTT4ul2.5MMNTP(A,C,G)0.8ulRNA酶抑制剂(25U/ul)RNA酶抑制剂(Promeg...
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2013-10
RNA实验技术:细胞质RNA提取实验
标签:细胞质RNA由于RNA的种类来源很多,因而提取制备方法各异,一般有苯酚法,去污剂法和盐酸胍法,其中苯酚法实验室zui常用。组织匀浆后用苯酚处理离心,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,向水相加冷乙...
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2013-10
RNA实验技术:Northern blot实验
标签:NorthernblotNorthernblot是一种通过检测RNA的表达水平来检测基因表达的方法,通过northernblot的方法可以检测到细胞在生长发育特定阶段或者胁迫或病理环境下特定基因...
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2013-10
RNA实验技术:RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤
一、实验目的学习RNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术。二、实验原理RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,R...