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2012-12
蛋白专题：PAGE胶上蛋白质的银染方法
PAGE胶上蛋白质的银染方法有数百种，其原理相似，具体步骤各不相同。银染为蛋白质的非特异性染色，呈“爆炸性”反应模式，用于蛋白定量时准确性差，但其敏感度高、简便易行，仍被广泛应用。下面列举的这三种方法...
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2012-12
蛋白专题：蛋白质免疫印迹（Western Blot ）
蛋白质免疫印迹（WesternBlot）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后...
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2012-12
HRM-遗传变异分析的新技术
高分辨率熔解（HRM）是一种基于双链DNA在升温时的解链行为的差异来区分不同的PCR产物的新技术。HRM技术的高分辨率使其得以区分即使是单个碱基的差异，因此该技术得以广泛应用于SNP分型、突变扫描、种...
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2012-12
细胞转染实验步骤
一、实验目的学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。二、实验原理上图所示是脂质体介导转染的示...
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2012-12
大肠杆菌感受态细胞的制备、重组DNA的转化、克隆筛选
1.实验目的和要求通过本实验学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.相关知识及原理感受态细胞（C...
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2012-12
RNA提取过程经验分享
1.RNA提取的样品很重要，包括样品的质量，细胞数，杂质含量等等，建议：按照说明书的要求，每毫升TRIzol不超过100mg再低些在50mg左右;样品的质量一定要控制好；研磨得时间不宜过长，成粉状即可...
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2012-12
一举两得！同时提取RNA和蛋白！
具体的提取步骤如下:1.样品加氯仿分层后,移去上层水相（该水相里就是RNA，可照常继续进行RNA的提取）,加0.3ml乙醇沉淀中间层和有机相中的DNA，涡旋混合，室温放置3分钟，2-8℃不超过2000...