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2013-12
蛋白质技术专题:蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
[原理]蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4gSDS/1g蛋白质比例的SDS-蛋白质多肽复合物,该复合物带负电,故可在聚丙烯酰胺凝胶电泳中向...
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2013-12
蛋白质技术专题:蛋白质纯化胶体过滤法
不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离;是一种广泛应用的partition色析法(Pharmacia操作手册,GelFiltration)。仪器设备:色析管柱(PharmaciaC...
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2013-11
蛋白质技术专题:液相色谱之反相液相色谱
反相色谱(reversedphascchromatography,RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越...
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2013-11
蛋白质技术专题:蛋白标准品(Marker)知识汇总
相关专题蛋白Marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。在westernblot过程中,分子量Ma...
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2013-11
蛋白质技术专题:重组DNA技术与基因工程(组图)
重组DNA技术是现代分子生物技术发展中zui重要的成就之一。即是基因工程(GeneEngineering)的核心技术。重组DNA技术(RecombinantDNATechnique)是人类根据需要选择...
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2013-11
蛋白质技术专题:凝胶层析法脱盐和分离蛋白质
(一)原理凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing)。脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法...
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2013-11
蛋白质技术专题:蛋白质凝胶电泳凝胶的制备
【材料与试剂】(1)30%的丙烯酰胺:分别称取29g丙烯酰胺,1gN,N-亚甲双丙烯酰胺加温热的去离子水60ml,加热至37℃溶解,补加水至终体积为100ml,过滤,即配成30%(w/v)丙烯酰胺贮存...