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2013-11
蛋白质技术专题:双向电泳操作步骤
水化上样(被动上样)1.从冰箱中取出IPG胶条,室温放置10min。2.沿水化盘槽的边缘从左向右线性加入样品,槽两端各1cm左右不加样,中间的样品液一定要连贯。注意:不要产生气泡,否则会影响胶条中蛋白...
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2013-11
蛋白质技术专题:免疫共沉淀(Co-IP)详细步骤教程
一、原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理...
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2013-11
蛋白质技术专题:蛋白质的表达、分离和纯化
目的要求(1)了解克隆基因表达的方法和意义。(2)了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的...
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2013-11
蛋白质技术专题:蛋白质免疫印迹(Western Blot )
标签:western-blot免疫印迹蛋白质蛋白质免疫印迹(WesternBlot)可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白...
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2013-11
PCR技术专题:差示反转录PCR实验
标签:差示反转录PCR差示反转录PCR也称为mRNA差异显示技术,它是将mRNA反转录技术与PCR技术二者相互结合发展起来的一种RNA指纹图谱技术,具有简便、灵敏、RNA用量少、效率高、可同时检测两种...
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2013-11
PCR技术专题:PCR-SSP分析实验原理和步骤
[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端*个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR反应过程中,只有引物3′端*个碱基与决定特定等位基因的碱基互补时才能实现DNA片...
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2013-11
PCR技术专题:间接原位PCR(原位杂交PCR)
与直接原位PCR所不同的是,靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入,而是标记一段与扩增片段互补的探针,在扩增结束后,应用此探针进行原位杂交。因此,此处主要介绍原位杂交,其余方法同原位PCR。一、预杂交1....