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2013-8
DNA实验技术：原位杂交实验要求及步骤2
三、操作步骤（一）取材、冰冻切片：将动物以3%戊巴比妥钠麻醉，打开胸腔，暴露心脏，刺破右心耳，将针尖刺入左心室用生理盐水灌注（灌注量约为动物体重的2倍），再注入等量的4%多聚甲醛。（见图2-7）。取材...
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2013-8
DNA实验技术：原位杂交实验要求及步骤1
原位杂交组织（或细胞）化学（InsituHybridizationHistochemistry，ISHH）简称原位杂交（InSituHybridization），属于固相分子杂交的范畴，它是用标记的D...
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2013-7
DNA实验技术：限制性内切酶消化DNA实验
标签：限制性内切酶消化DNA影响限制性内切酶反应的因素很多。DNA制品中的污染均能抑制酶切活性。这种抑制可通过增加酶作用单位数、增大反应体枳以稀释可能的抑制剂或延长反应时间来加以克服。实验方法单酶单D...
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2013-7
DNA实验技术：DNA斑点和狭线印迹实验
斑点和狭线印迹是一种将混合的未经分离的面定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上进行杂交分析的简单技术。用来检测被印迹的1DNA制品中靶序列的相对丰度。实验方法多样抽滤法实验材料DNA试剂、试剂盒SSCNaClNa...
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2013-7
DNA实验技术：重组质粒的连接、转化及筛选
*节概述质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段（＜10kb）且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的，先用限制性内切酶切割质粒DNA和目...
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2013-7
DNA实验技术：DNA的酶切实验
采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单，但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同（主要是盐离子浓度不同）或反应温...
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2013-7
DNA实验技术：亚硫酸氢盐修饰后测序法检测甲基化
甲基化检测方法（亚硫酸氢盐修饰后测序法）甲基化是目前的研究热点，就我所做的一点工作并其中一点心得，与大家分享。希望能够对大家有所帮助。*部分基因组DNA的提取。这一步没有悬念，*可以购买供细胞或组织使...