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Microbiologics公司推荐的各菌种的生长条件

更新时间：2013-03-09 浏览次数：4778

 

推荐生长条件
（适用于KWKK-STIK 和LYFO DISK 产品）
 
如何选择的菌种生长条件
 
1.         zui初的生长是在非选择性琼脂培养基上。除非特殊情况或特别推荐，zui初的生长一般不考虑液体培养基。这是由于在液体培养基中获得冻干菌株的纯种比较困难，污染所带来的杂菌可能会过度生长，影响得到目标菌株的纯种。
 
2.         以下列出可供选择的琼脂培养基和相应的生长条件，供各实验室培养菌种时参考。
 
方法 1
ü       胰蛋白胨大豆琼脂，非选择性羊血琼脂，标准计数平板，或营养琼脂-----35℃，正常环境，24-48小时。
方法 2
ü         非选择性羊血琼脂----- 35℃，正常环境，24-48小时。
方法 3
ü         巧克力琼脂（含血红蛋白和NAD）-----35℃，5％－10％ CO2环境，24-48小时。
方法 4
ü         厌氧血琼脂-----35℃，厌氧环境，48-72小时；
ü         部分专性厌氧菌可能需要5－7天，才能充分生长；
ü         对于梭菌，以下新鲜配制的平板也可选用：营养琼脂，胰蛋白胨大豆琼脂和标准平板计数琼脂（标准方法琼脂）；只是需额外培养24小时。
方法 5
ü         沙保氏葡萄糖Emmons琼脂-----25℃，正常环境，2-7天；
ü         沙保氏葡萄糖琼脂-----25℃，正常环境，2-7天；
ü         非选择性羊血琼脂也可选用；
ü         以下培养基也可选用：营养琼脂，胰蛋白胨大豆琼脂，马铃薯葡萄糖琼脂和标准平板计数琼脂，只是需额外培养24小时。
方法 6
ü         巧克力琼脂（含血红蛋白和NAD）-----35℃，微需氧环境，48-72小时。
方法 7
ü         Lowenstein Jensen琼脂或Middlebrook琼脂-----35℃，5％－10％ CO2环境或正常环境，7天。
 
 
 
方法 8
ü         缓冲活性炭酵母提取物琼脂-----35℃，正常环境，3-5天。
方法 9
ü         V 琼脂或巧克力琼脂-----35℃，5％－10％ CO2环境，48小时。
方法 10
ü         脑心浸出液肉汤，胰蛋白胨大豆肉汤，或0.85％生理盐水均可选用。
ü         非选择性羊血琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂-----35℃，正常环境，24-48小时。
方法 11
ü         先接种于MRS肉汤中-----35℃，正常环境，48小时；
然后接入含羊血的哥伦比亚CNA培养基中-----35℃，5％ CO2环境，48小时。
方法 12
ü         马铃薯葡萄糖琼脂-----45℃，正常环境，48-72小时。
方法 13
ü         取一颗冻干颗粒于10 B 精氨酸肉汤中，若是KWIKSTIK则溶于自带的培养基中。作系列梯度稀释（例如，1:10，1:100，1:1000，1:10000）。在35℃下，正常环境中培养。精氨酸瓶中液体一旦变成粉红色（24-48小时），转接0.1 mL到A-8琼脂，划线分离。人型支原体，35℃，5-10%CO2环境；解脲支原体，35℃，厌氧环境，培养96个小时。使用显微镜观察平板菌落。
方法14
ü         取一颗冻干颗粒于SP4葡萄糖肉汤中，若是KWIKSTIK则溶于自带的培养基中。作系列梯度稀释（例如，1:2，1:4，1:8，1:16，1:32）。在35℃下，正常环境中培养。一旦肉汤从红色变成黄色（1-4周），转接0.2 mL到SP4葡萄糖琼脂，划线分离。不要使用棉质拭子或木质棒。35℃，CO2环境中，可以使用烛缸，培养5-15天。使用显微镜观察平板菌落。
方法15
ü         取一颗冻干颗粒于10 B 精氨酸肉汤中，若是KWIKSTIK则溶于自带的培养基中。作系列梯度稀释（例如，1:10，1:100，1:1000）。在35℃下，正常环境中培养。一旦肉汤从黄色变成粉红色（48-72个小时），转接0.2 mL到SP4葡萄糖琼脂，划线分离。不要使用棉棒或者木质棒，将平板至于35℃厌氧环境中培养3-6天。使用显微镜观察平板菌落。
方法16
ü         Leeming Notman琼脂，30℃下，正常环境中培养72个小时。
 
各类菌株的推荐培养方法如下： 
  
                                             
Acinetobacter sp.
不动杆菌属
方法1
Acetobacter sp.
醋杆菌属
方法3
注：25℃培养3-4天。
 
 
Actinobacillus sp.
放线杆菌属 
方法3
Actinomyces sp.
放线菌属
方法4
Aerococcus sp.
气球菌属
方法1
Aeromonas sp.
气单胞菌属
方法2
注：Aeromonas hydrophila （嗜水气单胞菌）应在30℃培养。Aeromonas salmonicida（杀鲑气单胞菌）应在25℃培养。
Alcaligenes  sp.
产碱杆菌 
方法1
Alicyclobacillus sp.
脂环酸芽孢杆菌

 
方法12
Alloiococcus sp. Method 2
 
 

 

Aneurinibacillus sp.
硫胺素芽孢杆菌属
方法1
Aquaspirillum sp.
水螺菌属
方法1
注：25℃培养6天。
 
 
Arcanobacterium sp.
隐秘杆菌属
方法2
Arthrobacter sp.
节杆菌属
方法1

 
注：25℃培养。

 
Aspergillus sp.
曲霉菌属
方法5
Bacillus sp.
芽孢杆菌属
方法1
注：一些芽孢杆菌属经证明在室温下保存后的传代恢复率高于在2-8℃中保存的。
Bacteroides sp.
拟杆菌属
方法4

 
注：Bacteroides ureolyticus（解尿素拟杆菌）应培养5天，菌落很小。有时需要多传1代以得到足够的供试菌落。
Bifidobacterium sp.
双岐杆菌属
方法4
Bordela sp.
博德特氏菌属
方法3
注：可能需要一周的培养时间；正常环境也可。
注：Bordela pertussis （百日咳杆菌） （MicroBioLogics 目录号0843） 需添加了15%去纤维蛋白羊血的包姜氏（Bordet Gengou）培养基。
Brevibacillus sp.
短芽孢杆菌属
方法1
Brevundimonas sp.
短波单胞菌属

 
方法1
Brochothrix sp.
环丝菌属
方法1
注：25℃培养。
 

 

Budvicia sp.
布戴约维采菌属
方法1
注：25℃培养。
Burkholderia sp.
 伯克霍尔德菌属

 
方法1
Campylobacter sp.
 弯曲杆菌属
方法6

 
注：巧克力琼脂是Campylobacter jejuni（空肠弯曲杆菌）的zui适普遍生长培养基。在zui初的48小时培养期内不要揭开接过种的平皿。
Candida sp.
念珠菌属
方法5
Capnocytophaga sp.
噬二氧化碳菌属
方法3
Cellulosimicrobium sp.
纤维微细菌
方法1
Chryseobacterium sp.
金黄杆菌属
方法1
Citrobacter sp.
柠檬酸杆菌属
方法1
Cladosporium sp.
枝孢霉属
方法5
Clostridium sp.
梭菌属
方法4
注：Clostridium baratii（巴氏梭菌） 只在厌氧血平板上生长。
Corynebacterium sp.
棒杆菌属
方法1
Cryptococcus sp.
隐球菌属
方法5
注：Cryptococcus（隐球菌）需在25℃培养。
Deinococcus sp.
异常球菌属
方法1
Delftia sp.
代尔夫特菌属
方法1
Edwardsiella sp.
爱德华菌属
方法1
Eggerthella sp.
埃格特菌
方法4
Eikenella sp.
埃肯菌属
方法3
Enterobacter sp.
肠道细菌属
方法1
Enterococcus sp.
肠球菌属
方法1
Erysipelothrix sp.
丹毒丝菌属
方法2
Escherichia coli
大肠杆菌
方法1
Exiguobacterium sp.
微小杆菌属
方法1
Finegoldia sp.
芬戈尔德菌属
方法4
注：厌氧环境中培养72-96小时。
Flavobacterium sp.       产黄菌属
方法1
注：30℃培养。
Fluoribacter sp.
荧光杆菌属
方法8
Fusarium sp.
镰刀菌属
方法5
Fusobacterium sp.
梭杆菌属
方法4
Gardnerella sp.
加德纳氏菌属
方法9
Gemella sp.
兼性双球菌属
方法4
Geobacillus sp.
地芽孢杆菌属
方法1
注：Geobacillus stearothemophilus （嗜热脂肪地芽孢杆菌）需在55℃培养。Geobacillus stearothemophilus，MBL货号为0137，在羊血琼脂上不能生长。
Geotrichum sp.
地丝菌属
方法5
Haemophilus sp.
嗜血杆菌属
方法3
Hafnia sp.
哈夫尼菌属
方法1
Issatchenkia sp.
伊萨酵母属
方法5
Kingella sp.
金氏杆菌属
方法2
注：在5-10% CO2 环境下培养。
Klebsiella sp.
克雷伯氏菌属 
方法1
Kloeckera sp.
克勒克酵母属
方法5
Kocuria sp.
库克菌属
方法1
注：K.糠疹应在25℃培养。
Lactobacillus sp.
乳酸杆菌 
方法2
注：L. acidophilus （嗜酸乳杆菌）, L. casei （干酪乳杆菌）, L. delbrueckii （德氏乳杆菌） 和L.gasseri （加氏乳杆菌）需用方法11。
Lactococcus sp.
乳球菌属
方法2
Leclercia sp.
勒克菌属
方法1
Legionella sp.
军团菌属
方法8

 
Listeria sp.
李斯特菌属
方法1
Macrococcus sp.
巨型球菌属
方法1
Malassezia sp.
马拉色氏霉菌属
方法16
Mannheimia sp.
曼海姆菌属
方法1
Methylobacterium sp.
甲基杆菌属
方法1
注：25℃培养。在标准平板计数琼脂上生长。
Microbacterium sp.
细杆菌属
方法1
注：30℃培养。
 
 
Micrococcus sp.
微球菌属
方法1
注：胰蛋白胨大豆琼脂或非选择性的羊血琼脂对于货号0337和0689是的生长培养基。
Micromonas sp.
微单胞菌属
方法4
注：Micromonas Micros（微小微单胞菌）需在厌氧环境中培养5-7天。
Microsporum sp.
小孢菌属
方法5
注：Microsporum canis（犬小孢子菌）在沙保氏葡萄糖琼脂上生长困难。
Moraxella sp.
莫拉菌属

 
方法2
Morganella sp.
摩根（氏）菌属
方法1
Mycobacterium sp.
分枝杆菌属
方法7

 
注：Mycobacterium gordonae （戈氏分枝杆菌）, Mycobacterium terrae （地分枝杆菌）和Mycobacterium Tuberculosis （结核病分枝杆菌） 可能需要一个月的培养时间。
支原体属
注： Mycoplasma hominis（人型支原体）必须按照方法13。Mycoplasma orale（口腔支原体）必须按照方法15。Mycoplasma pneumoniae（肺炎支原体）必须按照方法14.

 
Myroides sp.
香味菌属
方法 2
Neisseria sp.
奈瑟（氏）菌属
方法 3
注：巧克力平板是Neisseria sp.（奈瑟菌）的zui适普遍生长培养基。在zui初的48小时培养期内不要揭开接过种的平皿。
Nocardia sp.
诺卡氏菌属
方法1
Novosphingobium sp.
鞘脂单胞菌属
方法1

 
注：25℃培养。
 
 
Ochrobactrum sp.
苍白杆菌属
方法1

 
Oligella sp.
寡源杆菌属
方法2
Paecilomyces sp.
拟青霉属
方法5
Paenibacillus sp.
类芽胞杆菌属
方法1
Parabacteroides
 
方法4
Pasteurella sp.
巴斯德菌属
方法2
Pediococcus sp.
片球菌属
方法11
注：Pediococcus damnosus（有害片球菌）需从MRS肉汤转入MRS琼脂上次代培养，需在25℃培养。
Penicillium sp.
青霉菌属

 
方法5
Peptoniphilus sp.
嗜胨菌属
方法4
注：在厌氧环境中培养72-96小时。
Peptostreptococcus sp.
消化链球菌属
方法4
Plesiomonas sp.
毗邻单胞菌属
方法1
Porphyromonas sp.
卟啉菌属
方法4
注：需在厌氧环境培养5-7天。
Prevola sp.
普雷沃菌属
方法4
注：需在厌氧环境培养5-7天。
Propionibacterium sp.
丙酸菌属
方法4
注：需在厌氧环境培养3-5天。
Proteus sp
变形菌属
方法1
Prototheca sp.
原壁菌属
方法5
Providencia sp.
普罗威登斯菌属
方法1
Pseudomonas sp.
假单胞菌属
方法1
注：Pseudmonas fluorescens（荧光假单胞菌）应在25℃培养，假单胞菌属（MicroBioLogics 目录号0162） 应在30℃培养。
Ralstonia sp.
雷尔氏菌
方法1
Raoulla sp.
拉乌尔菌属
方法1
Rhizopus sp.
根霉菌属
方法5
Rhodococcus sp.
红球菌属
方法2
Rhodotorula sp.
红酵母属
方法5
Saccharomyces sp.
酵母菌属
方法5
注：沙保氏葡萄糖琼脂和沙保氏葡萄糖Emmons 琼脂是Saccharomyces sp.（酵母菌属）生长的zui适培养基。
Salmonella sp.
沙门氏菌属         方法1
Scopulariopsis sp., ,
帚霉属
方法5
Serratia sp.
粘质沙雷菌
方法1
Shewanella sp.
希瓦氏菌属
方法10
Shigella sp.
志贺菌属
方法1
Sordaria sp.
粪壳菌属
方法5
注：Sordaria sp.（粪壳菌属）在沙保氏葡萄糖Emmons 琼脂上比在沙保氏葡萄糖琼脂上更易形成孢子。
Sphingobacterium sp.
鞘氨醇杆菌属
方法1
Sphingomonas sp.
鞘氨醇单胞菌属
方法1
注：25℃培养。
 
 
Staphylococcus sp.
葡萄球菌属
方法1
注：对于金黄色葡萄球菌，MBL货号为0158，对万古霉素的耐受力随着菌龄、培养基种类、传代数变化而降低，传菌zui适是在脑心浸出液琼脂中加入4 mg/L万古霉素。
Stenotrophomonas sp.
寡养单胞菌
方法1
Streptococcus sp.
链球菌属
方法2
注：Streptococcus cricetus（大鼠链球菌）应在微需氧环境培养。Streptococcus sp.（链球菌属）（MicroBioLogics货号 #0978） 应在CO2中生长。
Streptomyces sp.
链霉菌属
方法5

 
注：Streptomyces sp.（链霉菌属）不能在马铃薯葡萄糖琼脂上生长。
Thermoanaerobacterium sp.
高温厌氧芽孢杆菌属
方法4
注：T. thermosaccharolyticum （嗜热细菌热解糖热厌氧杆菌，MicroBioLogics目录号0728） 的zui初生长培养基应为庖肉培养基。45° C，培养72小时。然后接种至厌氧血平板上培养，45° C，72 小时，厌氧环境培养。
Trichophyton sp.
发癣菌属
方法5
Trichosporon sp.
毛孢子菌属
方法5
Ureaplasma sp.
脲原体属
方法13
Veillonella sp.
韦荣球菌属
方法4
Vibrio sp.
弧菌属
方法10
注：Vibrio alginolyticus（溶藻弧菌）应在哥伦比亚血琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂上培养。
Virgibacillus sp.
枝芽孢菌属
方法1
Yarrowia sp.
亚罗酵母属
方法5
Yersinia sp.
耶尔森菌属
方法1
Zygosaccharomyces sp.
接合酵母属
方法5
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