实验试剂

1.   10％中性福尔马林(pH6．8～7．1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋酸钠 2g

2.   酸性磷酸酶作用液

　 蒸馏水 90ml 0．2mol／L醋酸缓冲液(pH4．6) 12ml 5％* 2ml

3.   2％β—甘油磷酸钠 4ml

　 先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合，随后分成大致相等的两份，一份中加*溶液，另一份加甘油磷酸钠溶液，然后再将两者缓缓混合，边混边搅匀后若酸碱度值不到pH5．0，可加少量醋酸的调整。此作用液在临用前配制，不能贮存。配好后的作用液应透明无絮状悬浮物和沉淀，否则将严重影响实验结果。

4.   1％硫化胺溶液

　　硫化胺 1ml 蒸馏水 9ml

5.   姬姆萨染液(1：30)

　　姬姆萨原液 3滴 磷酸盐缓冲液(pH6．8) 5ml

6.   6％淀粉肉汤

　　牛肉膏 0．3g 蛋白胨 1.0g 氯化钠 0．5g 蒸馏水 100ml

　　高压灭菌9．9×104pa(15磅)20min，再加入可溶性淀粉6g，水温浴，促使溶解后置冰箱保存备用。

实验步骤

1.   取小白鼠一只，每日腹腔注射6％淀粉肉汤1ml，连续注射三天。

2.   在第三天注射后3～4h，再向腹腔注射生盐水1ml，过3min后在原注射部位抽取腹腔液0．1～0．2ml。请注意!注射和抽液的进针部位和深度要保持一致。否则可能抽不出腹腔液。

3.   将腹腔液滴在预冷的载玻片上，每片1～2滴，涂片，将玻片垂直插入玻片架，迅速放到冰箱内(4℃)，让细胞自行铺展。

4.   30min后，将玻片转入10％中性福尔马林，冰箱内4℃固定30min。

5.   自来水漂洗5min，把水甩干。

6.   转入酸性磷酸酶作用液中，37℃处理30min。

7.   自来水漂洗片刻。

8.   1％硫化胺处理3～5min。

9.   自来水冲洗，甩干。

10.用1∶30的姬姆萨染液染色15min。

11.自来水冲去染液，用磷酸盐缓冲液临时封片，镜检。

12.对照实验：

将第3步的腹腔液涂片置50℃温箱中处理30min，使酶失活，再进行6～11步的同样实验。