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2015-5
Omega质粒小量提取流程
实验试剂1.使用前,将RNaseA全部加入SolutionI中并于4度保存。2.按下表用无水乙醇稀释DNAWashBuffer,并于室温保存。D6948-00B:加入8ml无水乙醇D6948-01B:...
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2015-5
细菌中蛋白质的提取与纯化技术
实验试剂采用T7?TagAffinityPurificationKitT7?Tag抗体琼脂。B/W缓冲液:4.29mMNa2HPO4,1.47mMKH2PO4,2.7mMKCl,0.137mMNaCl...
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2015-5
从琼脂糖凝胶(Agaros gel)中回收DNA片段
实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过...
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2015-5
蛋白质浓度测定(双缩脲法)
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有凯氏定氮法;比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及染料结合法;紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法:在碱性溶液中,双缩脲(H2N—CO—NH...
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2015-5
微生物生物量和生长曲线的测定
实验原理我们知道微生物都具有生长旺、繁殖快的特点,单细胞微生物如细菌、酵母菌的个体细胞的增大即细胞物质的增加是有限度的,细胞长大到一定程度就开始分裂繁殖,菌体数量增多。细菌旺盛生长时几十分钟就可繁殖一...
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2015-5
EMSA凝胶迁移
实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术zui初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和...
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2015-5
LB培养基的配制
实验步骤1.LB培养基Tryptone10gYeastExtract5gNaCl10g加水至1000mL(pH7.2,固体培养基加1.8%琼脂粉)。2.LB抗性筛选培养基待灭菌后的LB固体培养基温度降...